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Temperature: Lowering the expression temperature (15-25°C) will improve the solubility of recombinantly expressed proteins. • Mostly due to leaking expression • ~80% protein growth and expression problems are caused by the toxicity of. • If the protein is toxic, use (DE3) strain to prevent expression before induction. • If the protein is from eukaryotes, use codon plus strain if there are a lot of rare codons. • If the protein has problem in folding, you can either refold. In addition, expression of proteins that contain disulfide bonds is highly unfavorable in the reducing conditions present in the cytoplasm, as disulfide bonds between cysteines are quickly reduced [20]. Protein Expression and Purification is an international journal providing a forum for the dissemination of new information on protein expression, extraction, purification, characterization, and/or applications using conventional biochemical and/or modern molecular biological approaches and methods, which are of broad interest to the field.

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